Page 50 - 03-Ecologization
P. 50
DOI: https://doi.org/10.15414/2020.9788055222783
Экологизация защиты растений для сохранения биоразнообразия насекомых и опылителей
растительное сырье заливают растворителем в соотношении 1:5
(сырье:растворитель). Если сырье поглощает много растворителя (например,
виды Senecio), необходимо увеличить соотношение до 1:10 или даже до 1:20. Смесь
встряхивают в колбах Эрленмейера на лабораторном встряхивателе в течение
минимум 4 часов, и настаивают от 24 до 72 часов и более (для более полного
экстрагирования БАВ) при температуре +24 ± 2℃. Также проводили непрерывную
экстракцию в аппаратах Сокслета (метод перколяции) при нагревании
растворителя и конденсации паров в обратном холодильнике.
Затем полученный экстракт отфильтровывали через бумажный фильтр на
воронке Бюхнера под вакуумом и упаривали на роторном испарителе до полного
удаления растворителя. Полученный сухой остаток взвешивали и растворяли в
четырехкратном количестве 96% этилового спирта, в результате чего получали
20% (по сухому остатку) спиртовой раствор. Полученные 20% (по сухому остатку)
экстракты хранили при температуре +4℃ в темной посуде. Перед тестированием в
лабораторных и полевых условиях 20% экстракты разбавляли дистиллированной
водой до необходимых концентраций (как правило от 0,1 до 5,0% по сухому
остатку). Содержание этилового спирта в рабочих растворах растительных
экстрактов не должно превышать 10-12%. Нами экспериментально было доказано,
что данная концентрация этилового спирта не влияет на результаты скрининга.
Тем не менее, при тестировании на фитофагах растительных экстрактов, имеющих
в качестве основы-растворителя этанол, в качестве контроля необходимо
использовать водно-спиртовой раствор в концентрации, соответствующей
разбавлению экстракта.
Получение эфирных масел.
Получение конкрета. Процесс экстракции состоит из двух этапов:
собственно извлечение компонентов из растительного сырья петролейным
эфиром и последующем удалении растворителя (при пониженном давлении на
роторном испарителе). В результате получают «конкрет» с содержанием эфирного
масла от 5 до 20%. Из конкрета эфирные масла извлекают этиловым спиртом:
растворяют конкрет в спирте, при этом в раствор переходит 20-60% конкрета.
Остаток отфильтровывают при сильном охлаждении для отделения от восков, а
спиртовой раствор обесцвечивают активированным углем и выпаривают в
вакууме. Получают абсолютное масло («абсолю»), которое перед тестированием
мы разбавляли дистиллированной водой до необходимой концентрации.
Метод гидродистилляции. Извлечение эфирного масла из свежего или
сухого растительного сырья методом гидродистилляции (Hesham et al., 2016)
проводят путем перегонки навески сырья (200 г для свежего и 100 г для сухого
растения) с дистиллированной водой (воду добавляют в соотношении сырье:
растворитель 1:6 и 1:8) в 1-2 литровой колбе с обратным холодильником. Колбу с
содержимым нагревают на газовой плитке (горелке) или электроплитке с
закрытой спиралью (и регулятором мощности нагрева) и кипятят от часа до 3-4
часов и более. Время перегонки зависит от вида растения и некоторых других
факторов. Чаще всего впервые устанавливается экспериментальным путем.
Например, для получения эфирного масла из можжевельника казацкого,
различных видов сосны и пр. для наиболее полного извлечения эфирного масла
необходимо кипятить растительное сырье в течение трех часов и более (до
прекращения увеличения объема эфирного масла, определяемого визуально в
приемнике Гинзберга). Эфирное масло собирают в подвешенный свободно в колбе
приемник Гинзберга. После перегонки приемник извлекают, охлаждают на воздухе
49